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Wednesday, April 22, 2020

DÍA DE LA TIERRA


     Nuestro planeta. Algunos científicos lo han caracterizado por comportarse como un superorganismo. Otros han dicho que algunas de sus características son autoregulación, autosostenibilidad y equilibrio. Sea cual fuere la definición, es nuestro hogar.
       Durante muchos años la excesiva intervención humana sobre los recursos terrestres, sin planes de manejo sustentable, ha repercutido negativamente sobre la estabilidad de nuestra hermosa "canica azul".
       Hoy, en que estamos retirados en nuestras casas esperando vencer al siniestro virus que nos acosa, el planeta descansa en cierto modo. La contaminación ha disminuido, los animales aparecen entre las calles de nuestras ciudades y podemos escuchar al viento cómo canta entre las hojas de los árboles.
       Es momento de pensar en qué haremos cuando "volvamos a salir" al planeta y caminar por su suelo, respirar su aire libre y contemplar su cielo azul.
        Ojala que todos podamos entender que la salud de nuestro planeta es responsabilidad de todos y que todos podemos contribuir para hacer que nuestro hogar sane del daño acumulado.
        Es el único planeta habitado y habitable...dónde iremos si lo destruimos?

Friday, April 17, 2020

El origen proximal del SARS-CoV-2



Al Editor - Desde los primeros informes de neumonía nueva (COVID-19) en Wuhan, provincia de Hubei, China 1 , 2 , ha habido una discusión considerable sobre el origen del virus causante, SARS-CoV-2 3 (también mencionado como HCoV-19) 4 . Las infecciones por SARS-CoV-2 ahora están generalizadas, y hasta el 11 de marzo de 2020, se habían confirmado 121.564 casos en más de 110 países, con 4.373 muertes 5 .
El SARS-CoV-2 es el séptimo coronavirus que se sabe que infecta a los humanos; El SARS-CoV, MERS-CoV y el SARS-CoV-2 pueden causar una enfermedad grave, mientras que HKU1, NL63, OC43 y 229E están asociados con síntomas leves 6 . Aquí revisamos lo que se puede deducir sobre el origen del SARS-CoV-2 del análisis comparativo de datos genómicos. Ofrecemos una perspectiva sobre las características notables del genoma del SARS-CoV-2 y discutimos los escenarios por los cuales podrían haber surgido. Nuestros análisis muestran claramente que el SARS-CoV-2 no es una construcción de laboratorio o un virus manipulado a propósito.

Características notables del genoma SARS-CoV-2

Nuestra comparación de alfa y betacoronavirus identifica dos características genómicas notables del SARS-CoV-2: (i) sobre la base de los estudios estructurales 7 , 8 , 9 y los experimentos bioquímicos 1 , 9 , 10 , el SARS-CoV-2 parece ser optimizado para unirse al receptor humano ACE2; y (ii) la proteína espiga del SARS-CoV-2 tiene un sitio funcional de escisión polibásica (furina) en el límite S1-S2 a través de la inserción de 12 nucleótidos 8 , lo que condujo adicionalmente a la adquisición prevista de tres glicanos unidos por O alrededor el sitio.

1. Mutaciones en el dominio de unión al receptor de SARS-CoV-2

El dominio de unión al receptor (RBD) en la proteína espiga es la parte más variable del genoma coronavirus 1 , 2 . Seis aminoácidos RBD han demostrado ser críticos para la unión a los receptores ACE2 y para determinar el rango de hospedadores de virus similares al SARS-CoV 7 . Con coordenadas basadas en SARS-CoV, son Y442, L472, N479, D480, T487 e Y4911, que corresponden a L455, F486, Q493, S494, N501 e Y505 en SARS-CoV-2 7 . Cinco de estos seis residuos difieren entre SARS-CoV-2 y SARS-CoV (Fig. 1a ). Sobre la base de los estudios estructurales 7 , 8 , 9 y los experimentos bioquímicos 1 , 9 , 10., SARS-CoV-2 parece tener un RBD que se une con alta afinidad a ACE2 de humanos, hurones, gatos y otras especies con alta homología de receptores 7 .

Si bien los análisis anteriores sugieren que el SARS-CoV-2 puede unir ACE2 humano con alta afinidad, los análisis computacionales predicen que la interacción no es ideal 7 y que la secuencia RBD es diferente de las que se muestran en el SARS-CoV para ser óptimas para la unión del receptor 7 , 11 . Por lo tanto, la unión de alta afinidad de la proteína de la punta del SARS-CoV-2 a la ACE2 humana es probablemente el resultado de la selección natural en una ACE2 humana o similar a la humana que permite que surja otra solución de unión óptima. Esta es una fuerte evidencia de que el SARS-CoV-2 no es producto de una manipulación intencionada.

2. Sitio de escisión de furina polibásico y glicanos unidos a O

La segunda característica notable del SARS-CoV-2 es un sitio de escisión polibásica (RRAR) en la unión de S1 y S2, las dos subunidades de la espiga 8 (Fig. 1b ). Esto permite la escisión efectiva por furina y otras proteasas y tiene un papel en la determinación de la infectividad viral y el rango de hospedador 12 . Además, una prolina líder también se inserta en este sitio en SARS-CoV-2; así, la secuencia insertada es PRRA (Fig. 1b ). Se predice que el giro creado por la prolina dará como resultado la adición de glucanos unidos a O a S673, T678 y S686, que flanquean el sitio de escisión y son exclusivos del SARS-CoV-2 (Fig. 1bNo se han observado sitios de escisión polibásica en los betacoronavirus del 'linaje B' relacionados, aunque otros betacoronavirus humanos, incluido el HKU1 (linaje A), tienen esos sitios y los glicanos O-ligados 13 . Dado el nivel de variación genética en la espiga, es probable que se descubran virus similares al SARS-CoV-2 con sitios de escisión polibásica parcial o total en otras especies.
Se desconoce la consecuencia funcional del sitio de escisión polibásica en SARS-CoV-2, y será importante determinar su impacto sobre la transmisibilidad y la patogénesis en modelos animales. Los experimentos con SARS-CoV han demostrado que la inserción de un sitio de escisión de furina en la unión S1-S2 mejora la fusión célula-célula sin afectar la entrada viral 14 . Además, la escisión eficiente de la espiga MERS-CoV permite que los coronavirus tipo MERS de los murciélagos infecten células humanas 15 . En los virus de la gripe aviar, la replicación y transmisión rápidas en poblaciones de pollo altamente densas selecciona la adquisición de sitios de escisión polibásicos en la proteína 16 de hemaglutinina (HA), que cumple una función similar a la de la proteína espiga de coronavirus. La adquisición de sitios de escisión polibásicos en HA, por inserción o recombinación, convierte los virus de influenza aviar de baja patogenicidad en formas altamente patógenas 16 . La adquisición de sitios de escisión polibásica por HA también se ha observado después del paso repetido en cultivo celular o a través de animales [ 17] .
La función de los glucanos ligados a O pronosticados no está clara, pero podrían crear un 'dominio similar a la mucina' que proteja los epítopos o los residuos clave en la proteína 18 de la espiga del SARS-CoV-2 Varios virus utilizan dominios similares a la mucina como escudos de glucano que implican inmunoevasión 18 . Aunque la predicción de la glicosilación ligada a O es sólida, se necesitan estudios experimentales para determinar si estos sitios se usan en el SARS-CoV-2.

Teorías del origen del SARS-CoV-2

Es improbable que el SARS-CoV-2 surgiera a través de la manipulación de laboratorio de un coronavirus similar al SARS-CoV relacionado. Como se señaló anteriormente, el RBD de SARS-CoV-2 está optimizado para unirse al ACE2 humano con una solución eficiente diferente de las predichas previamente 7 , 11 . Además, si se hubiera realizado la manipulación genética, uno de los varios sistemas de genética inversa disponibles para los betacoronavirus probablemente se habría utilizado 19 . Sin embargo, los datos genéticos muestran irrefutablemente que el SARS-CoV-2 no se deriva de ningún esqueleto de virus usado previamente 20En cambio, proponemos dos escenarios que pueden explicar de manera plausible el origen del SARS-CoV-2: (i) selección natural en un huésped animal antes de la transferencia zoonótica; y (ii) selección natural en humanos después de la transferencia zoonótica. También discutimos si la selección durante el pasaje podría haber dado lugar a SARS-CoV-2.

1. Selección natural en un huésped animal antes de la transferencia zoonótica

Como muchos de los primeros casos de COVID-19 estaban vinculados al mercado de Huanan en Wuhan 1 , 2 , es posible que haya una fuente animal presente en este lugar. Dada la similitud del SARS-CoV-2 con los coronavirus 2 similares a los del SARS-CoV , es probable que los murciélagos sirvan como reservorios para su progenitor. Aunque RaTG13, muestreado de un murciélago Rhinolophus affinis 1 , es ~ 96% idéntico en general al SARS-CoV-2, su pico diverge en el RBD, lo que sugiere que puede no unirse de manera eficiente al ACE2 7 humano Fig.1a ).
Los pangolines de Malasia ( Manis javanica ) importados ilegalmente a la provincia de Guangdong contienen coronavirus similares al SARS-CoV-2 21 . Aunque el virus RaTG13 bate sigue siendo el más cercano de SARS-CoV-2 en todo el genoma 1 , algunos coronavirus pangolín exhiben una fuerte similitud con SARS-CoV-2 en el RBD, incluyendo todos los seis residuos de RBD clave 21 (Fig. 1 ). Esto muestra claramente que la proteína de pico de SARS-CoV-2 optimizada para unirse a ACE2 de tipo humano es el resultado de la selección natural.
Ni los betacoronavirus de murciélago ni los betacoronavirus de pangolín muestreados hasta ahora tienen sitios de escisión polibásica. Aunque no se ha identificado ningún coronavirus animal que sea lo suficientemente similar como para haber servido como el progenitor directo del SARS-CoV-2, la diversidad de coronavirus en los murciélagos y otras especies se subestima masivamente. Las mutaciones, inserciones y deleciones pueden ocurrir cerca de la unión S1-S2 de coronavirus 22, que muestra que el sitio de escisión polibásica puede surgir por un proceso evolutivo natural. Para que un virus precursor adquiera tanto el sitio de escisión polibásico como mutaciones en la proteína espiga adecuada para unirse al ACE2 humano, un huésped animal probablemente tendría que tener una alta densidad de población (para permitir que la selección natural proceda eficientemente) y una codificación de ACE2 gen que es similar al ortólogo humano.

2. Selección natural en humanos después de la transferencia zoonótica

Es posible que un progenitor de SARS-CoV-2 salte a los humanos, adquiriendo las características genómicas descritas anteriormente a través de la adaptación durante la transmisión no detectada de humano a humano. Una vez adquiridas, estas adaptaciones permitirán que la pandemia despegue y produzca un grupo de casos lo suficientemente grande como para activar el sistema de vigilancia que lo detectó 1 , 2 .
Todos los genomas del SARS-CoV-2 secuenciados hasta ahora tienen las características genómicas descritas anteriormente y, por lo tanto, se derivan de un antepasado común que también los tenía. La presencia en pangolines de una RBD muy similar a la del SARS-CoV-2 significa que podemos inferir que esto también se debió probablemente al virus que saltó a los humanos. Esto deja que la inserción del sitio de escisión polibásica ocurra durante la transmisión de humano a humano.
Las estimaciones del momento del antepasado común más reciente del SARS-CoV-2 realizado con datos de secuencia actuales apuntan a la aparición del virus a fines de noviembre de 2019 hasta principios de diciembre de 2019 23 , compatible con los primeros casos confirmados retrospectivamente 24Por lo tanto, este escenario supone un período de transmisión no reconocida en humanos entre el evento zoonótico inicial y la adquisición del sitio de escisión polibásica. Podría haber surgido una oportunidad suficiente si hubiera habido muchos eventos zoonóticos anteriores que produjeron cadenas cortas de transmisión de persona a persona durante un período prolongado. Esta es esencialmente la situación para MERS-CoV, en el que todos los casos humanos son el resultado de repetidos saltos del virus de camellos dromedarios, produciendo infecciones únicas o cadenas de transmisión cortas que eventualmente se resuelven, sin adaptación a la transmisión sostenida 25 .
Los estudios de muestras humanas almacenadas podrían proporcionar información sobre si se ha producido dicha propagación críptica. Los estudios serológicos retrospectivos también podrían ser informativos, y algunos de estos estudios se han realizado mostrando exposiciones de bajo nivel a coronavirus similares al SARS-CoV en ciertas áreas de China 26 . Sin embargo, estos estudios no pudieron distinguir de manera crítica si las exposiciones se debieron a infecciones previas con SARS-CoV, SARS-CoV-2 u otros coronavirus similares al SARS-CoV. Se deben realizar más estudios serológicos para determinar el alcance de la exposición humana previa al SARS-CoV-2.

3. Selección durante el pasaje

La investigación básica que implica el paso de coronavirus de tipo SARS-CoV de murciélago en cultivos celulares y / o modelos animales ha estado en curso durante muchos años en laboratorios de nivel 2 de bioseguridad en todo el mundo 27 , y hay casos documentados de escapes de laboratorio de SARS-CoV 28 . Por lo tanto, debemos examinar la posibilidad de una liberación inadvertida de SARS-CoV-2 en el laboratorio.
En teoría, es posible que el SARS-CoV-2 haya adquirido mutaciones RBD (Fig. 1a ) durante la adaptación al pasaje en cultivo celular, como se ha observado en estudios de SARS-CoV 11 . Sin embargo, el hallazgo de coronavirus de tipo SARS-CoV de pangolinas con RBD casi idénticos, proporciona una explicación mucho más fuerte y parsimoniosa de cómo el SARS-CoV-2 los adquirió mediante recombinación o mutación 19 .
La adquisición tanto del sitio de escisión polibásica como de los glicanos O-ligados predichos también argumenta en contra de escenarios basados ​​en cultivos. Se han observado nuevos sitios de escisión polibásica solo después del paso prolongado del virus de la influenza aviar de baja patogenicidad in vitro o in vivo 17Además, una generación hipotética de SARS-CoV-2 por cultivo celular o paso de animales habría requerido el aislamiento previo de un virus progenitor con una similitud genética muy alta, lo que no se ha descrito. La generación posterior de un sitio de escisión polibásica habría requerido un paso repetido en cultivos celulares o animales con receptores ACE2 similares a los de los humanos, pero dicho trabajo tampoco se ha descrito previamente. Finalmente, la generación de los glicanos O-ligados pronosticados también es improbable debido al paso del cultivo celular, ya que tales características sugieren la participación de un sistema inmune 18 .

Conclusiones

En medio de la emergencia global de salud pública de COVID-19, es razonable preguntarse por qué los orígenes de la pandemia son importantes. La comprensión detallada de cómo un virus animal saltó los límites de las especies para infectar a los humanos de manera productiva ayudará a prevenir futuros eventos zoonóticos. Por ejemplo, si el SARS-CoV-2 se preadapta en otra especie animal, existe el riesgo de futuros eventos de reaparición. Por el contrario, si el proceso de adaptación se produjo en humanos, incluso si se producen transferencias zoonóticas repetidas, es poco probable que despeguen sin la misma serie de mutaciones. Además, la identificación de los parientes virales más cercanos del SARS-CoV-2 que circulan en animales será de gran ayuda para los estudios de la función viral. De hecho, la disponibilidad de la secuencia de murciélago RaTG13 ayudó a revelar mutaciones clave de RBD y el sitio de escisión polibásica.
Las características genómicas descritas aquí pueden explicar en parte la infecciosidad y la transmisibilidad del SARS-CoV-2 en humanos. Aunque la evidencia muestra que el SARS-CoV-2 no es un virus manipulado a propósito, actualmente es imposible probar o refutar las otras teorías de su origen descritas aquí. Sin embargo, dado que observamos todas las características notables de SARS-CoV-2, incluida la RBD optimizada y el sitio de escisión polibásica, en coronavirus relacionados en la naturaleza, no creemos que ningún tipo de escenario de laboratorio sea plausible.

Thursday, April 09, 2020

COVID-19: el análisis de redes genéticas proporciona una 'instantánea' de los orígenes de la pandemia


Fecha:
9 de abril de 2020
Fuente:
Universidad de Cambridge
Resumen:
El primer uso de técnicas filogenéticas muestra que el genoma del virus 'ancestral' más cercano a los de los murciélagos no era el tipo de virus predominante de Wuhan. El estudio traza la 'supernova incipiente' de COVID-19 a través de mutaciones genéticas a medida que se propaga desde China y Asia a Australia, Europa y América del Norte. Los investigadores dicen que sus métodos podrían usarse para ayudar a identificar fuentes de infección indocumentadas.

Investigadores de Cambridge, Reino Unido y Alemania han reconstruido los primeros "caminos evolutivos" de COVID-19 en humanos, a medida que la infección se extendió desde Wuhan a Europa y América del Norte, utilizando técnicas de redes genéticas.
Al analizar los primeros 160 genomas completos del virus que se secuenciarán de pacientes humanos, los científicos han mapeado parte de la propagación original del nuevo coronavirus a través de sus mutaciones, lo que crea diferentes linajes virales.
"Hay demasiadas mutaciones rápidas para rastrear cuidadosamente un árbol genealógico COVID-19. Utilizamos un algoritmo matemático de red para visualizar todos los árboles plausibles simultáneamente", dijo el genetista Dr. Peter Forster, autor principal de la Universidad de Cambridge.
"Estas técnicas son principalmente conocidas por mapear los movimientos de poblaciones humanas prehistóricas a través del ADN. Creemos que esta es la primera vez que se han utilizado para rastrear las rutas de infección de un coronavirus como COVID-19".
El equipo utilizó datos de genomas de virus muestreados de todo el mundo entre el 24 de diciembre de 2019 y el 4 de marzo de 2020. La investigación reveló tres "variantes" distintas de COVID-19, que consisten en grupos de linajes estrechamente relacionados, que denominan 'A', ' B 'y' C '.
Forster y sus colegas encontraron que el tipo más cercano de COVID-19 al descubierto en los murciélagos, el tipo 'A', el "genoma del virus humano original", estaba presente en Wuhan, pero sorprendentemente no era el tipo de virus predominante de la ciudad.
Se vieron versiones mutadas de 'A' en estadounidenses que, según informes, vivían en Wuhan, y se encontró una gran cantidad de virus de tipo A en pacientes de EE. UU. Y Australia.
El principal tipo de virus de Wuhan, 'B', prevaleció en pacientes de todo el este de Asia. Sin embargo, la variante no viajó mucho más allá de la región sin más mutaciones, lo que implica un "evento fundador" en Wuhan, o una "resistencia" contra este tipo de COVID-19 fuera de Asia Oriental, dicen los investigadores.
La variante 'C' es el tipo europeo principal, que se encuentra en pacientes tempranos de Francia, Italia, Suecia e Inglaterra. Está ausente de la muestra continental china del estudio, pero se ve en Singapur, Hong Kong y Corea del Sur.
El nuevo análisis también sugiere que una de las primeras introducciones del virus en Italia se produjo a través de la primera infección alemana documentada el 27 de enero, y que otra ruta temprana de infección italiana estaba relacionada con un "grupo de Singapur".
Es importante destacar que los investigadores dicen que sus técnicas de redes genéticas rastrearon con precisión las rutas de infección establecidas: las mutaciones y los linajes virales unieron los puntos entre los casos conocidos.
Como tal, los científicos argumentan que estos métodos "filogenéticos" podrían aplicarse a la última secuenciación del genoma del coronavirus para ayudar a predecir los puntos calientes globales futuros de transmisión y aumento de la enfermedad.
"El análisis de la red filogenética tiene el potencial de ayudar a identificar las fuentes de infección COVID-19 indocumentadas, que luego se pueden poner en cuarentena para contener una mayor propagación de la enfermedad en todo el mundo", dijo Forster, miembro del Instituto McDonald de Investigación Arqueológica de Cambridge, así como El Instituto de Educación Continua de la Universidad.
Los hallazgos se publican hoy en la revista Proceedings of the National Academy of Sciences ( PNAS ). El software utilizado en el estudio, así como las clasificaciones para más de 1,000 genomas y recuentos de coronavirus, está disponible de forma gratuita en http://www.fluxus-technology.com .
La variante 'A', más estrechamente relacionada con el virus encontrado tanto en murciélagos como en pangolines, es descrita por los investigadores como "la raíz del brote". El tipo 'B' se deriva de 'A', separado por dos mutaciones, luego 'C' es a su vez una "hija" de 'B'.
Los investigadores dicen que la localización de la variante 'B' en Asia Oriental podría resultar de un "efecto fundador": un cuello de botella genético que ocurre cuando, en el caso de un virus, se establece un nuevo tipo a partir de un pequeño grupo aislado de infecciones.
Forster argumenta que hay otra explicación que vale la pena considerar. "El virus de tipo B de Wuhan podría adaptarse inmunológica o ambientalmente a una gran parte de la población de Asia oriental. Es posible que necesite mutar para superar la resistencia fuera de Asia oriental. Parece que vemos una tasa de mutación más lenta en Asia oriental que en otros lugares, en esta fase inicial ".
Añadió: "La red viral que hemos detallado es una instantánea de las primeras etapas de una epidemia, antes de que los caminos evolutivos de COVID-19 se oscurezcan por un gran número de mutaciones. Es como atrapar una supernova incipiente en el acto".
Desde que se realizó el estudio PNAS de hoy , el equipo de investigación ha extendido su análisis a 1.001 genomas virales. Aunque aún no se ha revisado por pares, Forster dice que el último trabajo sugiere que la primera infección y propagación entre humanos de COVID-19 ocurrió entre mediados de septiembre y principios de diciembre.
Los métodos de red filogenética utilizados por los investigadores, que permiten la visualización de cientos de árboles evolutivos simultáneamente en un gráfico simple, fueron pioneros en Nueva Zelanda en 1979, y luego fueron desarrollados por matemáticos alemanes en la década de 1990.
Estas técnicas llamaron la atención del arqueólogo profesor Colin Renfrew, coautor del nuevo estudio PNAS , en 1998. Renfrew pasó a establecer uno de los primeros grupos de investigación en arqueogenética del mundo en la Universidad de Cambridge.
Referencia de revista :
  1. Peter Forster, Lucy Forster, Colin Renfrew, Michael Forster. Análisis de la red filogenética de los genomas del SARS-CoV-2 . Actas de la Academia Nacional de Ciencias , 2020; 202004999 DOI: 10.1073 / pnas.2004999117